Индукция и репарация двунитевых разрывов ДНК в клетках линии V79 при длительном воздействии низкоинтенсивного у-излучения
Год: 2013, том 9 Номер: №4 Страницы: 787-791
Рубрика: Генетика Тип статьи: Оригинальная статья
Авторы: Озеров И.В., Бушманов А.Ю., Анчишкина Н.А., Гурьев Д.В., Пустовалова М.В., Сметанина Н.М., Архангельская Е.Ю., Воробьева Н.Ю., Осипов А.Н.
Организация: ФГБУ «Государственный научный центр Российской Федерации — Федеральный медицинский биофизический центр им. А. И. Бурназяна Федерального медико-биологического агентства»,
Рубрика: Генетика Тип статьи: Оригинальная статья
Авторы: Озеров И.В., Бушманов А.Ю., Анчишкина Н.А., Гурьев Д.В., Пустовалова М.В., Сметанина Н.М., Архангельская Е.Ю., Воробьева Н.Ю., Осипов А.Н.
Организация: ФГБУ «Государственный научный центр Российской Федерации — Федеральный медицинский биофизический центр им. А. И. Бурназяна Федерального медико-биологического агентства»,
Резюме:
Цель: изучить закономерности изменений количества двунитевых разрывов (ДР) ДНК в клетках млекопитающих при длительном воздействии низкоинтенсивного у-излучения. Материал и методы. В работе использовали культуру фибробластов легкого китайского хомячка (линия V79). Облучение клеток у-лучами при мощности дозы 0,1 мГр/мин проводили на установке «Гамма-Панорама» (Cs-137). Для оценки изменений количества ДР ДНК использовали иммунофлуоресцентный анализ фокусов фосфорилированного гистона Н2АХ (у-Н2АХ). Частоту апоптотических клеток определяли методом «ДНК-гало». Для анализа продукции активных форм кислорода (АФК) использовали 5 (6) — хлорметил-2,7-дихлордигидрофлуоресцеиндиацетат. Результаты. Продемонстрировано, что при длительном низкоинтенсивном облучении клеток линии V79 в ранние сроки облучения (6-24 ч, дозы 3,6-14,4 сГр) наблюдается увеличение количества фокусов у-Н2АХ и продукции АФК, а в более поздние сроки (48-72 ч, дозы 28,8-43,2 сГр) снижение этих показателей практически до контрольного уровня. Статистически достоверных изменений доли апоптотических клеток при этом обнаружено не было. Заключение. Процессы, обусловливающие изменения количества ДР ДНК в клетках млекопитающих при длительном воздействии низкоинтенсивного у-излучения, по всей видимости, сопряжены с развитием оксидативного стресса и последующей активизацией антиоксидантных защитных систем клеток.
Ключевые слова: фокусы V-H2AX, низкая мощность дозы, клетки V79, двунитевые разрывы ДНК, апоптоз, активные формы кислорода, v-излучение
Литература:
1. Jeggo P. A., Lobrich М. Contribution of DNA repair and cell cycle checkpoint arrest to the maintenance of genomic stability // DNA Repair (Amst). 2006. Vol. 5(9-10). P. 1192-1198;
2. Sutherland B.M., Bennett P. V., Sidorkina O., Laval J. Clustered damages and total lesions induced in DNA by ionizing radiation: oxidized bases and strand breaks // Biochemistry. 2000. Vol. 39 (27). P. 8026-8033;
3. Goodarzi A.A., Jeggo P., Lobrich M. The influence of heterochromatin on DNA double strand break repair: Getting the strong, silent type to relax // DNA Repair (Amst). 2010. Vol. 9 (12). P. 1273-1282;
4. Halazonetis T. D., Gorgoulis V G., Bartek J. An oncogene-induced DNA damage model for cancer development // Science. 2008. Vol. 319 (5868). P. 1352-1355;
5. Mladenov E., Iliakis G. Induction and repair of DNA double strand breaks: the increasing spectrum of non-homologous end joining pathways// Mutat. Res. 2011. Vol. 711 (1-2). P. 61-72;
6. OsipovA. N., Buleeva G., Arkhangelskaya E., Klokov D. In vivo y-irradiation low dose threshold for suppression of DNA double strand breaks below the spontaneous level in mouse blood and spleen cell. // Mutat. Res. 2013. Vol. 756 (1-2). P. 141-145;
7. Changes in the number of double-strand DNA breaks in Chinese hamster V79 cells exposed to y-radiation with different dose rates/ K. V Kotenko, A.Y. Bushmanov, I. V Ozerov [et al.] // Int. J. Mol. Sci. 2013. Vol. 14, № 7. P. 13719-13726;
8. Singh N.P A simple method for accurate estimation of apoptotic cells // Exp. Cell Res. 2000. Vol. 256 (1) P. 328-337;
9. Osipov A.N., Lizunova E.Yu., Gur'ev D. V, Vorob'eva N.Yu. Genome Damage and Reactive Oxygen Species Production in the Progenies of Irradiated CHO-K1 Cells // Biophysics. 2011. Vol. 56, № 5. P. 931-935;
10. GammaH2AX foci analysis for monitoring DNA double-strand break repair: strengths, limitations and optimization / M. Lobrich, A. Shibata, A. Beucher [et al.] // Cell Cycle. 2010. Vol. 9 (4). P. 662-669;
11. A critical role for histone H2AX in recruitment of repair factors to nuclear foci after DNA damage / T.T. Paull, E. P. Rogakou, V Yamazaki [et al.] // Curr Biol. 2000. Vol. 10 (15). P. 886-895;
12. Sharma A., Singh K., Almasan A. Histone H2AX phosphorylation: a marker for DNA damage // Methods Mol. Biol. 2012. Vol. 920. P. 613-626;
13. Grudzenski S., Raths A., Conrad S., Rube C.E., Lobrich M. Inducible response required for repair of low-dose radiation damage in human fibroblasts // Proc. Natl. Acad.Sci. USA. 2010. Vol. 107 (32). P. 14205-14210;
14. DNA-PK phosphorylates histone H2AX during apoptotic DNA fragmentation in mammalian cells/ B. Mukherjee, С Kessinger, J. Kobayashi [et al.] // DNA Repair (Amst). 2006. Vol. 5 (5). P. 575-590;
15. Evasion of early cellular response mechanisms following low level radiation-induced DNA damage / S. J. Collis, J.M. Schwaninger, A.J. Ntambi [et al.] // J. Biol. Chem. 2004. Vol. 279 (48). P. 49624-49632.
| Прикрепленный файл | Размер |
|---|---|
| 2013_04-01_787-791.pdf | 362.58 кб |
Русский
English